德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS  FALCON FLIM 熒光壽命成像顯微鏡

清晰的對比，即時產生壽命成像

德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS  FALCON FLIM 熒光壽命成像顯微鏡（FAst Lifetime CONtrast，快速壽命對比）是功能成像的未來發展方向。 利用熒光壽命成像的*性能來研究細胞生理學并探索活細胞動力學。 STELLARIS FALCON 是一款整合的熒光壽命成像 (FLIM) 解決方案，以視頻速率進行熒光壽命成像來研究活細胞的快速動力學。

STELLARIS  FALCON 為您的成像增加了一個新的對比維度，實現生物傳感以及跟蹤蛋白質之間的相互作用。 現在，熒光壽命成像信息可用于STELLARIS 系統的所有模塊。

您現在可以：

通過 FLIM-FRET（熒光共振能量轉移）跟蹤分子間的快速相互作用。

使用生物傳感器檢測代謝狀態和微環境的變化

通過壽命對比區分多個熒光團

經過簡單的培訓即可獲得熒光壽命成像數據

貓眼組織切片。 同時進行的光譜（灰色）和 FLIM（彩色）共聚焦成像顯示了壽命對比情況。 使用 STELLARIS FALCON 和 LAS X 軟件采集和顯示。

通過 FLIM-FRET 跟蹤分子間相互作用

現代科研工作研究分子間如何進行相互作用來完成重要任務。 FLIM-FRET 是探索這種相互作用的金標準。

STELLARIS FALCON 為 FLIM 儀器設定了新的速度標準。

它能在高度動態的細胞事件中完成熒光共振能量轉移 (FRET)實驗。 您可以在日常實驗中采集和分析 FRET 數據。

HeLa 細胞中的籠鎖cAMP，表達 EPAC mT2-dVenus FRET 傳感器。 EPAC對紫外線介導的cAMP解籠鎖的反應（中心區域）。 視頻采集速度4幀/秒。 圖像大小： 256 x256 像素。 顏色條的尺度（壽命）：ns。 由荷蘭阿姆斯特丹癌癥研究所的Kees Jalink和Bram van den Broek提供。

用生物傳感器監測細微而快速的變化

生物傳感器是代謝活動、信號傳導機制、酸堿度和微環境變化的*報告元件。

STELLARIS  FALCON 可提供熒光壽命中包含的信息，即使在膜電位動力學這類高速事件中也不例外。 這些信息是 STELLARIS 系統提供的光譜熒光強度成像和TauSense模式的有力補充。

用活化肽刺激后的鈣振蕩。 單個細胞中的響應被記錄為壽命變化。 視頻以4 pfs速率拍攝。 圖像大小： 256 x 256個像素。 顏色條的尺度（壽命）：ns。 由荷蘭阿姆斯特丹癌癥研究所的Kees Jalink和Bram van den Broek提供。

更可靠、更靈敏的代謝成像

自發熒光 在傳統成像中可能是一個問題。 STELLARIS 8 FALCON 可將其轉化為有價值的信息。 您現在可以將自發熒光轉化為代謝狀態、細胞分化和癌癥發展的報告元件。

此外，STELLARIS FALCON 能夠對活組織進行成像對比，而熒光標記通常是非特異性的，或者會破壞生理條件。

非生理條件下哺乳動物細胞的自發熒光 （酸堿度為 8.5）。 信號與內源性 NAD/NADH 的變化相關。 氧化應激的發展表現為熒光壽命隨時間縮短。 原始圖像大小： 512 x 512 像素。 顏色條的尺度（壽命）：ns。

超越光譜選項的熒光基團分離

熒光標記是區分細胞內結構的標準方法。 光譜分離方法非常*，但有時當發射光譜太接近時，這個方法就會受到限制。

使用 STELLARIS  FALCON，您可以充分利用熒光壽命成像的潛力，使用指數擬合、譜圖擬合和新的 FLIM 相量分離分析功能來分離多個熒光探針。

交互式圖像： 通過壽命對比加以區分的細胞骨架結構。 波形蛋白用Alexa Fluor 555（綠色）免疫標記，微管蛋白用Alexa Fluor 546（藍色）免疫標記。 熒光基團的光譜非常相似，但它們可通過熒光壽命信息區分。 圖像大小： 512 x 512 像素。

強度FLIM

使用 STELLARIS FALCON 進行快速壽命成像

STELLARIS FALCON 顯微鏡克服了FLIM的速度限制，可快速提供壽命數據。

到目前為止，由于FLIM的技術限制，從快速過程的熒光壽命數據中獲取功能信息仍有很大難度。 FLIM采集速度比記錄共聚焦強度至少慢10倍。

使用 STELLARIS FALCON 快速熒光壽命對比成像， 您能夠以適當的速度跟蹤細胞的動態過程。 這是因為采用了一種新的時間測量方法，即采用 TCSPC（時間相關單光子計數）技術和智能的數據處理和分析算法。

《自然》網站上的應用指南： SP8 FALCON：熒光壽命成像的新概念，實現視頻速率的共聚焦熒光壽命成像

含有Alexa Fluor 555（綠色）溶液中的熒光珠（品紅色）單通道圖像。 基于熒光壽命的熒光基團分離可以在不同的速度下進行，例如 16幀/秒（上）、27幀/秒（視頻速率，中）和 83幀/秒（超快，下）。 通過壽命信息進行染料分離明顯比強度信息（灰度）更有優勢。 視頻展示了壽命組分的逐像素擬合。 幀大小： 512 x 64 像素。 比例尺： 10微米。

一體化的多模態成像

STELLARIS  FALCON 使 FLIM 與其他模態的結合變得十分簡單。 一直以來，研究人員都不得不處理復雜的布線和繁瑣的文件傳輸工作。 使用 STELLARIS  FALCON，您可以將壽命信息整合到標準的共聚焦工作流程中。

STELLARIS  FALCON 可

整合到 LAS X 采集與分析軟件中。 它既可以同時記錄4個光譜通道，又可先后記錄多達10個通道的熒光壽命成像。 使用 STELLARIS FALCON，您能夠在 3D 層掃、延時序列乃至大型拼接成像方式中獲得熒光壽命信息。

使用  LAS X NAVIGATOR，您可以將觀察區域擴大10,000 倍，更快地識別感興趣的區域，以全新的方式研究樣本。

輕松采集復雜樣本。 高分辨率小鼠胚胎成像，由包含1.9億像素的722張圖像拼接而成。 通過四個

熒光壽命擬合的FLIM數據，彩色編碼。 采集時間： 1小時23分。 分析時間： 1小時

通過相量簡單確定壽命

使用 STELLARIS 8FALCON 的 FLIM 相量圖進行分析，可顯示壽命分量的 2D 圖。 通過 FLIM 相量分析，您可以跟蹤微環境變化，選擇多路信號的組分來確定 FRET 效率。

Alexa555-鬼筆環肽和 H2B-mCherry 標記的細胞。 使用 FLIM phasors 執行組分離。 相量圖清晰地顯示了兩種壽命分布。 樣本提供方： 德國康斯坦茨大學生物系 Martin St?ckl 博士。

只需點擊一下即可獲得您需要的結果

使用 LAS X 軟件，只需點擊一下即可獲得熒光壽命成像，方法與常規光譜成像相同。

即使您將顯微鏡當作一種輔助技術，您也可以找到重要的內容，并立即開始成像。

更專業的功能可作為工作流程提供，為您實現方便的自動化工作。

一鍵式設計，讓您能夠專注于科學研究： 由 LAS X 軟件控制的 STELLARIS  FALCON